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　　美国探偵事務所に巧美たちを実家に連れ戻すべく、奈々という女性が現れる。巧美たちははたして彼女の手から逃れられるのか？

　　家出して行方不明となっている兄・巧美を探してある街にやってきた恒。兄を探すのは困難かと思われ、捜し当てるまで帰らないと決意する恒だったが、あっさり見つけてしまう。しかし再会した巧美は美国探偵事務所の所長となっていた。巧美は、実家に帰る気配は全くない。恒は、兄が帰らないならばと、美国探偵事務所に居座ることを決意する…。

　　一年前母亲去世后，正就读高中三年级的女孩叶山小百合（伊藤莎莉 饰）便和父亲圭吾（Mummy-D 饰）相依为命。谁知在毫无征兆的情况下，父亲竟然再婚，他不仅带回来新的妻子（雾岛れいか 饰），还将对方的女儿志田由衣（佐久间由衣 饰）也带回家中。正值叛逆期的小百合自然无法接受，她感觉自己和死去的妈妈被爸爸背叛，因此大发脾气。就在关键时刻，由衣突如其来的一吻让小百合的内心颇受触动。自此之后，她这位陌生的姐姐升起极为复杂的情愫，不知不觉间便仿佛为对方所吸引。　　重新组建的家庭里，女孩和女孩的故事悄然上演……

　　少女☆歌剧 Revue Starlight -The LIVE-#2 Transition是多媒体企划少女☆歌剧 Revue Starlight的第二部音乐剧舞台，本作新登场了青岚综合艺术院的3位舞台少女、1位老师。相比前作，本作的人物性格一定程度向动画靠拢。　　其后青岚综合艺术院的3位舞台少女正式以二次元形象在手游少女☆歌剧 Revue Starlight -Re LIVE-登场，青岚综合艺术院的名字也在新作剧场版中出现。